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意義:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯(NADP)是一種酶促輔因子,參與許多氧化還原反應(yīng),在還原態(tài)(NADPH)和氧化態(tài)(NADP)之間循環(huán)。NADP還參與生物合成反應(yīng),如脂質(zhì)和核酸的合成,在那里它作為還原劑發(fā)揮作用。戊糖磷酸途徑(PPP)的氧化分支是動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生NADPH的主要來(lái)源。輔酶ⅡNADP (H) 廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NADP+和 NADPH 含量測(cè)定可以計(jì)算 NADP(NADPH + NADP+ )含量和 NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP+比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要標(biāo)志之一,而且在 PPP 途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。
原理:分別用酸性和堿性提取液提取樣品中 NADP+和 NADPH。NADPH 通過(guò) PMS 的遞氫作用, 使氧化型噻唑藍(lán)(MTT)還原為甲瓚,570nm 下檢測(cè)吸光值,從而測(cè)定 NADPH 含量。利用 6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原 NADP+為 NADPH,從而檢測(cè) NADP+含量。